1. 研究目的与意义
背景： 对二甲苯是无色透明液体，具有芳香气味。
比重0.861，熔点13.2℃，沸点138.5℃，闪点25℃，可燃，低毒化合物，毒性略高于乙醇。
有机溶剂对细胞的毒性很早就被人们所认识，一些有机溶剂比如甲苯和乙醇还被用于消毒杀菌。
2. 研究内容和预期目标
研究内容：本课题主要研究的是通过在培养基中加入对二甲苯来筛选出具有较高耐受性的菌株。
预期目标：通过在LB培养基加入适量的对二甲苯进行筛选，获得一株或几株耐受性高的菌株，再对筛选出的菌株进行耐受性的测定，用相关鉴别细菌的方法进行鉴定，测定菌株的16sDNA，希望获得具体的菌株种属。
3. 研究的方法与步骤
方法：从土壤中分离得到一株或几株耐受性高的菌株；测定菌株的耐受性，在显微镜下观察菌株形态；通过革兰氏染色、16sdna测序；测定菌株的种属。
步骤：1. 稀释摇瓶培养(1) 制作摇瓶培养液将lb培养液配好，加入锥形瓶中，每瓶50ml，蒸汽湿热灭菌，冷却至室温，调好ph待用；（lb培养液：胰蛋白胨10g、酵母提取物5g、nacl 10g 加蒸馏水定容至1l制作固体培养基还需加2%琼脂15g） (2) 制备泥土稀释溶液 选取较肥沃的土壤，铲去表土层，挖取5-20cm深的土壤数十克，装入灭过菌的牛皮纸袋内，封好袋口，做好编号记录，携回实验室供筛选用。
称取1份10g土样，加入装有90ml无菌水的锥形瓶中，振荡约1h，使土样与水充分混匀，将细胞分散，静置30min。
4. 参考文献
1.王刚,吕熹,李俊,郭明珠,王波,陈光.有机溶剂耐受性脂肪酶的研究进展.安徽农业科学.2010(02):575-5772.袁红玲,汤鲁宏,许正宏,陶文沂.产有机相催化酷合成活性的脂肪酶菌株的筛选.微生物学通报.2007(01):19-233.曹淑桂.有机溶剂中酶催化研究的新进展-酶催化活性和选择性的控制与调节.化学通报.1995(05)4.郭勇.酶工程研究进展与发展前景.华南理工大学学报:自然科学版.2002，30(011):130-1335.王庆利,何丹,郑晓冬,梅乐和.有机溶剂对细胞的毒害及细胞的耐受性机制. 微生物学通报.2OO2,29(4):81-856.王洪涛,王孝平,玄光善.有机溶剂耐受菌的研究进展.生物技术通报.2008，5：63-667.王洪淘,玄光善.有机溶剂耐受菌在环保中的应用.上海化工.2008，33：19-238.王鑫昕,王少华,李维,李寅,张延平.细菌的有机溶剂耐受机制.生物工程学报.2009，25（5）：641-6499. 宋亮,倪晔,孙志浩.基于蛋白质组学的假单胞菌耐溶剂机制研究.微生物学通报. 2012,39(4):46847610.唐啸宇,孙洪林.何冰芳耐有机溶剂微生物及酶类在生物催化中的应用.化学进展.2009,2726-2733
5. 计划与进度安排
1-4周 查阅文献，设计实验，完成开题报告5-14周 进行实验15-17周 撰写论文，答辩
