1. 研究目的与意义
1.1研究背景：枇杷为蔷薇科枇杷属，原产于我国亚热带地区，是名贵特产果品之一。因其果肉酸甜适口、营养丰富而深受消费者欢迎。我国拥有丰富的枇杷种质资源和大量的优良品种，枇杷生产总量占世界产量的绝大部分。并且近年来随着对高端水果的需求日益旺盛，枇杷的种植规模仍有扩大的趋势。
但是，枇杷采收恰逢高温多雨季节，生理活动旺盛，易受机械伤害和病菌侵染。如果在常温条件下贮藏，果实风味极易变淡且容易腐烂，故一般条件下难以长久储存和长途运销。
目前，国内外已经对枇杷贮藏保鲜技术多有报道，发现低温可有效抑制果实腐败，例如通过薄膜包装和no处理等等方法来降低采后果实的腐烂度，但过度低温又会使果实出现木质化败坏等冷害状况，严重影响枇杷的食用品质。而且，大多报道都集中于枇杷果肉的研究方面，对枇杷采后果皮的生理研究鲜有报道。
2. 研究内容和预期目标
| 2.1研究内容： (1) 采后白沙枇杷果皮与果肉MDA含量随着储存时间的变化规律； 采用硫代巴比妥酸法测定常温储存条件下白沙枇杷果皮与果肉MDA含量随着储存时间的变化规律，并比较果皮与果肉之间MDA含量变化规律的差异性，来探究采后枇杷衰老的生理学机制。 (2) 采后白沙枇杷果皮与果肉氧自由基产生速率随着储存时间的变化规律； 采用羟胺法测定常温储存条件下白沙枇杷果皮与果肉氧自由基产生速率随着储存时间的变化规律，并比较果皮与果肉之间氧自由基产生速率变化规律的差异性，来探究采后枇杷衰老的生理学机制。 (3) 采后白沙枇杷果皮与果肉POD活性随着储存时间的变化规律； 采用愈创木酚法测定常温储存条件下白沙枇杷果皮与果肉POD活性随着储存时间的变化规律，并比较果皮与果肉之间POD活性变化规律的差异性，来探究采后枇杷衰老的生理学机制。 (4) 采后白沙枇杷果皮与果肉SOD活性随着储存时间的变化规律； 采用邻苯三酚自氧化法测定常温储存条件下白沙枇杷果皮与果肉SOD活性随着储存时间的变化规律，并比较果皮与果肉之间SOD活性变化规律的差异性，来探究采后枇杷衰老的生理学机制。 (5) 采后白沙枇杷果皮与果肉CAT活性随着储存时间的变化规律； 采用紫外吸收法测定常温储存条件下白沙枇杷果皮与果肉CAT活性随着储存时间的变化规律，并比较果皮与果肉之间CAT活性变化规律的差异性，来探究采后枇杷衰老的生理学机制。
2.2预期目标：通过测定常温储存期间果皮与果肉活性氧代谢的相关生理指标的变化规律及差异，进一步探明其与采后枇杷变质之间的关系。 |
3. 研究的方法与步骤
| 3.1实验材料：以苏州本地白沙枇杷果实的果皮和果肉为研究材料，以常温存放（20℃）的枇杷果实为材料，测定采后储存期间果皮与果肉活性氧代谢的相关生理指标。 3.2实验方法: （1） 丙二醛MDA含量测定采用硫代巴比妥酸法，以mmol/g表示。丙二醛MDA在酸性条件下加热可与硫代巴比妥酸产生显色反应，产生红棕色的三甲川，其最大吸收波长532nm，利用吸光度值测定其含量。 （2） 氧自由基产生速率采用羟胺法测定，以μmol/(min.mg)表示。氧作为电子传递的受体，得到单电子时，生成超氧阴离子自由基O2-，利用羟胺氧化的方法可以测定生物系统中O2-的含量。O2-与羟胺反应生成NO2-，NO2-在对氨基苯磺酸和α－萘胺的作用下，生成粉红色的偶氮染料。取生成物在530nm波长处测定吸光度值，根据D530nm可以算出样品中的O2-含量。 （3） 过氧化物酶POD活性采用愈创木酚法测定，以每分钟D470nm升高0.01为1个活力单位（U），以U/mg酶蛋白表示其酶活性。在过氧化物酶POD的催化下，H2O2将愈创木酚氧化成茶褐色产物，此产物在470nm处有最大光吸收值，故可通过测470nm下的吸光度变化来测定过氧化物酶的活性。 （4） 超氧化物歧化酶SOD活性采用邻苯三酚自氧化法测定，以每分钟邻苯三酚自氧化速率抑制50%为1个活力单位（U），以U/mg酶蛋白表示其活性。在碱性条件下,邻苯三酚迅速氧化释放出超氧化物阴离子，生成有色中间产物，D325nm随之增加，使D325nm与反应时间呈良好的线性关系.SOD加入邻苯三酚自氧化反应体系后，催化超氧化物阴离子生成过氧化氢，使有色中间产物的生成受阻，导致吸光值下降，邻苯三酚自氧化速率降低，可作为测定SOD活性的理论依据. （5） 过氧化氢酶CAT活性采用紫外吸收法测定，以每分钟D240nm降低0.1为1个活力单位（U），以U/mg酶蛋白表示其活性。H2O2在240nm波长下有强烈吸收，过氧化氢酶能分解过氧化氢，使反应溶液吸光度随反应时间而降低，根据测量吸光率的变化速度即可测量过氧化氢酶的活力。 其中，粗酶液蛋白质含量按考马斯亮蓝G-250法测定，以牛血清蛋白为标准，以mg/g表示，每个样品取3次生物学重复，以平均值进行统计分析。 |
3.3分析方法：用Excel作图，以反应果皮果肉各项指标之间的变化规律和差异。
4. 参考文献
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5. 计划与进度安排
| 本论文的各阶段安排为： （1）2022年12月11日至2022年12月22日：与指导老师见面，确定论文选题； （2）2022年12月25日至2022年3月16日（第1周~第2周）：接受毕业论文任务书；查阅文献资料，撰写开题报告，完成开题；外文论文翻译； （3）2022年3月19日至2022年4月13日（第3周~第6周）：熟悉相关生理指标的测定方法与数据分析方法；完成预实验，及时调整实验方案，优化测定方法； （4）2022年4月16日至2022年5月18日（第7周~第11周）：完成全部生理学指标的生物学测试和分析内容； （5）2022年5月21日至2022年6月8日（第12周~第14周）：整理测试数据，绘制数据图表，分析各生理指标在不同处理之间随时间的变化趋势； （6）2022年6月11日至2022年6月15日（第15周）：提交外文翻译、数据和图标，毕业论文修改、定稿与毕业答辩。 |
