保加利亚乳杆菌ATCC11842全细胞催化法生产苯基乳酸的研究开题报告

 2021-08-08 22:23:27

1. 研究目的与意义

苯基乳酸是一种新型的天然防腐剂,首次发现是在Geotrichum candidum中可以抑制Listeriamonocytogens的生长。它具有抗革兰氏阳性菌、阴性菌和真菌等功能。防腐剂是食品工业中非常重要的一类添加剂,根据其来源不同可分为天然防腐剂和人工合成防腐剂两大类。由于消费者对于人工合成防腐剂的担忧以及对于天然食品的青睐,天然防腐剂的研究和开发利用成为食品工业的一个热点和发展趋势。苯基乳酸是一种新型的抑菌物质,有较广的抑菌谱,其抑制真菌活性强于一些常用的食品防腐剂,如苯甲酸钠、山梨酸钾等,而且它又是一种生物合成的天然化合物,有望作为新型天然防腐剂应用于食品工业或其他领域中。同时它与丹参素具有相同的药效。由于丹参的来源有限,提取分离步骤繁杂,因此学者们致力于其替代品的研究,现已发现丹参素的衍生物3-苯基乳酸与丹参素的药理作用相同,且有体外抗血小板聚集活性。随着新的分离、分析方法的建立和生物合成法研究的深入,将会大大拓宽苯乳酸的应用范围,使其在食品、医药、化上等领域发挥新的作用。苯基乳酸可由多种微生物产生,如霉菌中的白地霉和细菌中的丙酸菌。2000年,Lavermicocca等报道乳酸菌Lactobacillus plantarum 21B可以产生苯基乳酸,这是关于乳酸菌产生苯基乳酸的首次报道。乳酸菌自古以来就用于食品发酵和保藏,可产生多种抑菌物质,现在被视为安全(GRAS)微生物。许多乳酸菌除产生乳酸、乙酸和双乙酰等抗菌物质外,还可产生一些具有抑菌或杀菌作用的细菌素,如乳链菌素,片球菌素等,不过,大多数细菌素的抑菌谱较窄。近年来发现有些乳酸菌能产生另外一些广谱抗菌物质,苯乳酸就是其中之一。因此,乳酸菌来源的苯基乳酸成为研究的热点,目前已经发现了大量可以生产苯基乳酸的乳酸菌,这表明苯乳酸可能是乳酸菌的普遍代谢产物,但产量较低,并具有明显的个体差异,因此采用简便快速的方法合成苯乳酸具有非常重要的意义。本研究旨在利用保加利亚乳杆菌ATCC11842全细胞催化法生产苯基乳酸,研究该乳酸菌的生产潜能。

2. 国内外研究现状分析

2.1苯乳酸的结构和性质

苯基乳酸,又名β-苯基乳酸,系统名2-羟基-3-苯基丙酸,根据最近修订的《生物化学与分子生物学名词》(2006),推荐其称为苯乳酸。外观为淡黄色粉末,略有特殊性气味,其相对分子质量为166,熔点121-125℃,对酸、热稳定,dieuleveux发现现其在广泛的ph范围内稳定,120℃保持20 min也不被破坏。在水中的溶解度随温度升高而增大,易溶于甲醇、乙醚、丙酮等有机溶剂。其第二个碳原子为手性碳原子,因此有两种对映异构体除了空间结构方向相反之外,如图1-1所示。其他物理性质如:熔点、沸点、相对密度以及在非手性溶剂中的溶解度等都完全相同。而由于构成生物体的有机物大都是有旋光活性的,所以对映体间极为重要的区别是,它们对生物体的作用不同,d-苯乳酸的抑菌效果就强于l-苯乳酸,两者在化工、医药等领域的应用也各不相同。

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3. 研究的基本内容与计划

一、摸清保加利亚乳杆菌atcc11842保藏与培养方法;

二、菌株活化与培养:固体(时间久了就需要活化至新的固体)---刮一环至液体培养基活化,到达对数期后按10%接种量至放大的液体培养基,继续培养至对数中期;

三、优化催化条件:ph、辅助底物用量、底物浓度、菌体浓度;

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4. 研究创新点

本实验致力于用可以发酵生产苯乳酸的保加利亚乳杆菌ATCC11842。对培养基进行改良和优化,研究不同条件下苯基乳酸的产量,最优条件下的时间曲线,从生产成本和安全角度出发,为苯乳酸的生物制备工业化提供了大量的理论支持。

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