1. 研究目的与意义
建立一个漆酶与木聚糖酶的双功能酶作用于木质纤维素材料可以改进酶参与的一系列反应过程,在生物降解,纸浆漂白等领域具有非常实际的应用价值。
通常来说,当酶融合形成嵌合体,两个酶的催化区域可能相互靠近增加反应几率;融合酶与分开的单分子酶相比通常会提高活性。
为了实现漆酶基因和木聚糖酶基因在同一基因工程菌中的共表达,探究融合酶的最佳发酵条件以及融合酶的酶学性质,从而为融合酶的大规模生产和加速其在生物漂白技术中的应用奠定基础。
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2. 国内外研究现状分析
酶的分子改造和酶分子的重新设计是解决酶催化工业中应用瓶颈的有效手段。伴随着基因工程技术的成熟与应用,两个甚至更多个不同的基因之间相互之间的串联或彼此间的镶嵌从而形成嵌合基因成为可能,而一旦表达成产物就会获得融合蛋白。基于融合蛋白所设计的融合酶技术现已成为分子酶工程研究的一个热点问题,在多功能酶和酶的靠近效应的构建与控制的研究中已经逐渐得到应用,显示出了重要的应用价值。
3. 研究的基本内容与计划
研究融合酶中漆酶及木聚糖酶的酶学特性。
优化融合酶重组菌的表达条件,建立适宜的表达工艺。
进行融合酶基因工程菌的高密度发酵。
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4. 研究创新点
系统地研究所构建的融合酶的发酵条件以及酶学性质,为其进一步研究奠定基础。
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