番茄枯萎病和青枯病拮抗细菌的筛选、评价与测定开题报告

 2021-08-09 00:22:13

1. 研究目的与意义

茄果类蔬菜是我国的主要蔬菜,它们在人类日常饮食中占据重要地位。番茄枯萎病(病原菌为尖孢镰刀菌fusarium oxysporum f. sp. lycopersici)和青枯病(病原菌为茄青枯劳尔氏菌ralstonia solanacearum)是番茄生产中的两种主要土传病害。番茄青枯病又称细菌性枯萎病,田间发病症状与番茄枯萎病非常相似:多在番茄开花期间发生,随着坐果及果实膨大,病情逐渐加重。病原菌侵染维管束,阻塞其输送营养物质,病茎纵切面维管束变褐。

目前生产上主要采用化学药剂防治番茄枯萎病和青枯病,不仅造成生态环境严重污染,而且直接增加农产品有毒化学物质的残留量,对人类健康带来危害。生物防治对人畜安全、环境兼容性好、病菌不易产生抗药性,因而引起人们的重视,并初见成效。已报道的番茄枯萎病生防菌主要有木霉菌、非致病尖孢镰刀菌、假单孢菌和芽孢杆菌等;番茄青枯病生防菌主要有无致病力青枯菌和芽孢杆菌等。本文以番茄枯萎病菌和青枯病菌为靶标菌,采集土样,筛选、鉴定对两种病原菌皆具拮抗作用的细菌,旨在为生物防治两种土传病害提供试验依据。

因此现在的社会迫切需要找到一种合适的菌株来达到同时抑制青枯病菌和枯萎病菌。

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2. 国内外研究现状分析

青枯病是一种由青枯菌(ralstonia dolaanacearum)引起的毁灭性土传病害,发病植物茎叶萎蔫下垂直至全部枯死,是世界上危害最大、分布最广、造成损失最严重的植物病害之一,至今尚没有有效的化学农药和其他防治办法。因此青枯病被称为植物的癌症。植物青枯菌(r.dolaanacearum)可侵染40多个科200多种植物,仅次于农杆菌(agrobacteriumtumefaciens)。是番茄、马铃薯、花生、甘薯、烟草、辣椒、茄子、生姜、草莓、香蕉以及一些贵重药材和花卉植物许多植物生产的重要限制因素,世界各地均有分布。青枯病菌是一个复杂的群体,有明显的生理分化,不同地区和不同寄主来源的菌株,在寄主范围、致病力、生化型、血清型等细菌学特性上差异很大,因此增加了对此病害防治研究的难度。近几年来许多科研工作者从不同的角度不同方法对青枯菌进行了多方面的研究。

目前的研究结果显示, 青枯菌的致病机制及其调控远比科学家最初想象的要复杂和精妙。从2002年至今,已完成的7个青枯菌全基因组测序,为进一步揭示其致病机理和防治方法奠定了坚实的平台。只有通过对青枯病菌致病机制的更深入地研究, 才有可能找到控制它的有效方法。病原菌的检测是预测发病流行的基本,随着检测技术的不断发展,科研人员能够更容易的对病害做出诊断和预测,从而采取合适有效的防治措施。除农业和化学药剂防治外,我国丰富的微生物的资源在防治植物青枯病害有着光明的应用前景, 生物技术的发展使得利用遗传工程改造的产生高效生防菌成为可能, 这将大大推动植物青枯病的研究进展。

番茄枯萎病是由土传真菌尖孢镰刀菌引起的一种维管束病害,可对番茄生产造成严重危害。病原菌从根部为害植物,引起维管束病害,造成植株枯死,在植株的整个生育期均可发生。该病害在一年内就会由零星点片发展为普遍流行性病害,以瓜类枯萎病为例,病田一般减产20%-30%、严重田块可达50%-60%,甚至绝产。

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3. 研究的基本内容与计划

1、样本采集及菌株分离、纯化和培养

采集各地蔬菜根围土样共30份。细菌用稀释法分离。将细菌分离物平板置于28 ℃培养箱中培养48h后。病原细菌和病原真菌拮抗细菌的分离、纯化和培养分别在lb培养基和pda培养基中进行。

2、 细菌的拮抗性能测定

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4. 研究创新点

生物防治是环境友好的防治方法, 并有修复土壤生物多样性的作用,极具开发和推广潜力。随着化学药剂的长期使用,一系列的副作用, 如破坏生态平衡、造成次要病害猖獗、药剂残留造成水源土壤的污染、引起人畜中毒、抗性丧失等问题日益突出。因此, 符合现代农业可持续发展战略理念的生物防治方法备受科研人员的关注,已成为当今研究和开发的热点。

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