一种新型N-乙酰氨基葡萄糖苷酶基因的克隆表达及酶学特性研究开题报告

1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）

1. 几丁寡糖介绍几丁寡糖是壳聚糖的衍生物，与甲壳素不同的是，几丁寡糖由于其短链的长度而具有很好的水溶性[1]， 容易被机体吸收，并可以在体内完全自然降解。

甲壳素（几丁质）是一种天然存在的碱性粘多糖[2]， 广泛存在于甲壳纲节肢动物（蟹、虾等)的外骨骼、昆虫的表皮、软体动物的器官、植物和真菌的细胞壁以及绿藻之中[3]，属于聚多糖类[4]，为可食性动物纤维素，在 1991 年被国际学术界誉为继糖类、脂类、蛋白质、矿物质和维生素之后的生命第六要素，是用之不尽的可再生资源。

如果采用适当的方法将甲壳素降解，可以得到不同聚合度和乙酰度的几丁寡糖[5]。

2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

研究目的：本研究旨在发掘具有逆水解/转糖苷潜力的β-n-乙酰氨基葡萄糖苷酶，以n-乙酰氨基葡萄糖为原料，逆向合成几丁寡糖，从而实现几丁寡糖的酶法绿色生物制造。

本研究依据已有的β-n-乙酰氨基葡萄糖苷酶的基因序列信息，通过序列比对、功能预测分析、筛选归纳从实验室已有菌株c. meiyuanensis sybc-h1中获得潜在的具有逆水解／转糖苷活性β-n-乙酰氨基葡萄糖苷酶基因(cmnagase)。

利用基因工程技术，从c. meiyuanensis sybc-h1的全基因组dna中克隆得到目的基因，构建重组表达质粒。