联产乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶的活性枯草芽孢杆菌冻干粉的制备工艺优化开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

1 研究意义枯草芽孢杆菌作为一种革兰氏阳性细菌，由于其具有非致病性、分泌蛋白能力强的特性和良好的发酵基础及生产技术，是目前原核表达系统中表达和分泌外源蛋白的理想宿主，成为原核表达系统中的一种重要的模式菌株。

随着人们对枯草芽孢杆菌研究的深入开展,发现其在工业、农业、医药卫生、养殖等方面具有广泛应用价值。

在生产上选育优良菌种仅仅是第一步,要使菌种的作用得到很好的发挥,还必须优化发酵过程,从而得到较高的产物浓度。

2. 研究的基本内容和问题

1 研究目标优化联产乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶的活性枯草芽孢杆菌的发酵条件及冻干工艺。

2 研究内容2.1枯草芽孢杆菌的培养基优化单因素通过改变枯草芽孢杆菌培养基的碳源、氮源、无机盐离子，优化发酵培养基的配方,提高发酵液的含菌量及重组酶活力。

2.2枯草芽孢杆菌发酵条件的优化得到最佳培养基的的配方后，改变培养的温度，ph，装液量，接种量，转速，培养时间，得到最佳培养条件。

3. 研究的方法与方案

1 研究方法与实验方案1.1试验材料1.1.1　菌株枯草芽孢杆菌株，由南京农业大学酶工程研究室存留。

1.1.2　培养基种子培养基　胰蛋白胨10g，酵母提取物5g，nacl 10g，蒸馏水1 000 ml，ph6.8～ 7.0,121℃灭菌20 min。

发酵培养基　如表一，发酵条件37 ℃ ,初始ph 7.0，180 r/min振荡培养，250 ml摇瓶装液量100 ml。

4. 研究创新点

探索联产乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶的活性枯草芽孢杆菌最优发酵工艺，为工业化生产奠定基础。

5. 研究计划与进展

期限为2017年11月-2018年5月，主要分三个阶段完成。

第一阶段：2017年11月-2018年1月优化枯草芽孢杆菌的培养基配方。

第二阶段：2018年3月-2018年4月优化枯草芽孢杆菌的发酵条件。