1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
研究意义:
植物多糖,又称植物多聚糖,普遍存在于自然界植物体中,包括淀粉、纤维素、多聚糖、果胶等。许多植物多糖具有生物活性,具有包括包括免疫调节、降血糖、抗辐射、抗肿瘤、降血脂、保护肝脏、抗菌抗病毒等作用。
现阶段,人们对于茶树的利用主要集中在茶叶上,对于茶树花的研究利用较少,每年有许多的茶树花没有得到与其价值相对应的利用。在我国,每年全国可采集茶树鲜花400多万吨,可制成干花原料50多万吨。茶树花是一种无需重新栽培、储量丰富、年年可再生的天然资源。我国种植茶树的历史很悠久,每年的茶树花产量也很高,并且研究已知茶树花中含有较多的活性成分,因此对于茶树花的研究有着较好的物质基础和发展前景。近年来,研究人员发现,茶树花化学成分与茶鲜叶相似,且多糖含量比新茶叶高。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标
通过抗肿瘤活性和免疫调节活性的研究,明确茶树花多糖的生物活性,利用中国充分的茶树花资源,将茶树花变废为宝。
主要研究内容
3. 研究的方法与方案
研究方法
1、 植物多糖的提取方法。包括溶剂提取法,酸提取法,碱提取法,酶提取法,超滤分离法,复合方法等。
2、总糖含量的测定方法。硫酸苯酚法;蛋白质含量的测定方法:考马斯亮蓝显色再对照标曲分析;糖醛酸的测定方法:间羟联苯法法。
4. 研究创新点
特色或创新之处
在提取茶树花中的多糖时,用单一的提取方法往往效果欠佳,而复合方法,即将多种方法结合起来使用有时会达到比较好的提取效果。如超声酶法提取、酶法与膜分离技术结合,使多糖的提取效率大大提高。
本研究采取热水浸提法提取茶树花多糖,其优点为操作简单,干扰较少,能得到相对较高的提取率,而用酸碱提取易破坏多糖的空间结构及活性。继而采用超滤和离子交换色谱分离纯化茶花粗多糖,超滤法以压力差为推动力,根据筛分原理选择性的透过某些组分,实现提纯浓缩。deae纤维素阴离子交换层析柱利用茶花粗多糖中各成分所含负电荷数量的不同,从而对阴离子交换剂结合的强度不同而得以分离。
5. 研究计划与进展
研究计划及预期进展
第一阶段:(2016年11月-2016年12月):茶树花多糖的提取纯化。将茶树花水提后,过超滤膜,再醇沉后得茶树花的粗多糖,得到的粗多糖先经过deae纤维素阴离子交换树脂分离,再采用sephdex g-100葡聚糖凝胶进一步纯化。
第二阶段:(2016年12月-2017年1月):研究了经初步纯化的茶树花多糖的初级结构。包括纯度、相对分子质量、单糖组成和红外光谱分析。
