1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
本课题的意义：
丙烯酰胺（acrylamde，am）是一种白色晶体化学物质，极易溶于水、乙醇、甲醇、丙酮、二甲醚和三氯甲烷中，人体可通过消化道、呼吸道（吸烟）、皮肤黏膜等多种途径接触丙烯酰胺[1]。其在食品加工过程中可通过美拉德反应产生，极大的危害人们的健康。
l-天冬酰胺酶（ec3.5.1.1，l-asparaginase）可以专一催化l-天冬酰胺水解脱氨基生成l-天冬氨酸和氨。近几年，研究发现l-天冬酰胺酶还可以从根源上控制高热加工食品中丙烯酰胺形成，而对生产工艺，产品外观，风味以及营养等方面没有任何改变[2]。目前生产l-天冬酰胺酶是主要集中于利用微生物发酵法。l-天冬酰胺酶虽然在许多野生菌株菌株如大肠杆菌、欧文氏菌等中可以高效表达，但是一般筛菌所获得的野生型菌株酶活不是很理想，而且大部分菌株产酶不能够分泌至胞外，不利于后续目的产物的分离提取。采用分子生物技术构建基因工程菌可以实现目的蛋白的高效表达，也可以实现重组蛋白的分泌表达，但是目前目的基因以及所选用的宿主大多数都是具有潜在致病性的e. coli[3]，e. carotovora[4]等，有关食品安全表达体系的研究报道甚少。e. coli表达重组蛋白大部分都是存在于细胞内，而且容易形成无活性的包涵体，重组蛋白难以直接用于食品及医药行业。
2. 研究的基本内容和问题
研究的目标：
活化实验室保藏的解淀粉芽孢杆菌菌株，并使重组的l-天冬酰胺酶具有良好的酶活及稳定性，为其应用于食品加工行业奠定基础。
研究内容：
3. 研究的方法与方案
技术路线：
扩增解淀粉芽孢杆菌中目的基因、构建重组质粒、导入大肠杆菌、l-天冬酰胺酶基因的表达、重组酶活测定及酶学性质研究
4. 研究创新点
特色或创新之处：
首次实现解淀粉芽孢杆菌来源的L-天冬酰胺酶基因在大肠杆菌中的克隆表达，相对于野生菌来说，重组酶具有更高的催化活力及热稳定性，为后续实验提供研究基础，同时，催化活性及产量的提高使工业化生产成为可能。
5. 研究计划与进展
研究计划：
2016.10.20-11.15 对课题进行文献资料的阅读跟学习，并且完成文献综述；
2017.2.5-2017.2.28 进行l-天冬酰胺酶的克隆表达；
