1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
1研究意义
大豆蛋白是唯一的全价植物蛋白(即含有人体所需的9种必需氨基酸且含量满足人体需求),还具有调节血脂、调节胰岛素敏感性等丰富的保健功能,但由于大豆蛋白不易消化吸收,其功能特性在食品各方面的应用存在明显不足。利用乳酸菌降解大豆蛋白可使其更易消化吸收,具有低抗原性等,提高大豆蛋白产品的利用价值与附加值。
2 国内外研究概况
2. 研究的基本内容和问题
1 研究目标
由于大豆蛋白不易消化吸收,为使大豆蛋白充分发挥其营养保健功能,提高大豆蛋白产品的利用价值与附加值,本项目利用植物乳杆菌m-6、植物乳杆菌b1-6、植物乳杆菌70810、瑞士乳杆菌mb2-1和4株戊糖球菌共8株乳酸菌发酵大豆分离蛋白,通过sds-page电泳检测样品中大豆β-伴大豆球蛋白的变化,及elisa测定样品的过敏原性的变化,从而筛选出降解β-伴大豆球蛋白能力强的菌株,进一步探究其降解β-伴大豆球蛋白的机制。
2 研究内容
3. 研究的方法与方案
1 研究方法
(1)sds-page电泳:用于分离蛋白质和寡核苷酸。向具有分子筛效应的聚丙烯酰胺凝胶网状结构中引入十二烷基磺酸钠(sds)。由于sds是一种阴离子去污剂,在还原剂(β-巯基乙醇)存在时可以破坏蛋白质亚基之间的非共价键,使其解离成单个亚基,按照一定比例与蛋白质分子结合形成带负点的复合物,其负电荷远远超过蛋白质分子的原有电荷,从而消除或降低了不同蛋白质之间原有的电荷差别,使得电泳迁移率仅仅取决于蛋白质样品相对分子量大小这一因素。
(2)elisa检测:采用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接,然后通过酶与底物产生颜色反应,用于定量测定,测定的对象可以是抗体也可以是抗原。测量时,抗原(抗体)先结合在固相载体上,但仍保留其免疫活性,然后加一种抗体(抗原)与酶结合成的偶联物,此偶联物仍保留其原免疫活性与酶活性,当偶联物与固相载体上的抗原(抗体)反应结合后,再加上酶的相应底物,即起催化水解或氧化还原反应而呈颜色。其所生成的颜色深浅与欲测的抗原(抗体)含量成正比。 这种有色产物可用肉眼、光学显微镜、电子显微镜观察,也可以用分光光度计(酶标仪)加以测定。其方法简单,方便讯速,特异性强。
4. 研究创新点
本项目探究乳酸菌降解大豆蛋白特性时,直接以大豆分离蛋白作为唯一氮源进行发酵,避免了其他氮源的干扰影响乳酸菌的降解效果,可筛选出降解β-伴大豆球蛋白能力强的优质菌株,作为工业生产大豆蛋白新产品的参考。
5. 研究计划与进展
1 项目计划及进展
2017.3
8株乳酸菌的活化及其对大豆分离蛋白的发酵
