多肽-多糖纳米颗粒的化学交联法研究与优化开题报告

 2022-01-26 10:54:15

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

意义:多肽-多糖纳米颗粒能够应用于医药、食品工业中,作为药物和食品功能因子的口服输送载体。

因此研究多肽-多糖纳米颗粒的性能、结构和交联特性等有重大意义。

现状:目前已采用较多的化学交联法来获得多肽多糖交联物质。

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2. 研究的基本内容和问题

(1) 研究目标内容 1)采用单因素实验法和响应曲面法对多种不同的化学交联法和化学交联试剂对特定多糖多肽进行交联反应时的最佳样品浓度对应的交联剂浓度、反应时间、反应温度、缓冲液ph值。

进而分析对比其交联产物的特性和交联度找出最佳的交联法和所用交联试剂。

2)交联完成后用lc或电泳的方法将交联混合物进行分离, 再用水解酶将多肽多糖交联产物水解成多种肽段,然后利用质谱法对肽段进行鉴定以研究多肽多糖复合体内部结构以及相互作用 3)分析交联作用的基团和反应机理,努力探索和研究新型交联剂的应用和对化学交联法的优化。

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3. 研究的方法与方案

(1) 研究方法 1) 相应曲面法确定各类化学交联剂的最佳交联条件 2) 测定交联度和特异性交联产物的生成量 3) 应用电泳分离交联产物,再用水解酶将多肽多糖交联产物水解成多种肽段,然后利用质谱法对肽段进行鉴定以研究多肽多糖复合体内部结构以及相互作用的水平进行监测。

(2) 实验方案 多肽含量的测定磷钼酸沉淀法: 利用磷钼酸可以沉淀分子量 10000 以上的含氮物质。

取灭酶后的酶解液 20ml 置于 50ml 容量瓶中, 加入 15ml 水及 2ml 钼酸钠液, 摇匀, 立即用滤纸重复过滤至滤清, 将滤液稀释适当倍数后取 1ml 用福林酚法测定低肽的含量。

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4. 研究创新点

1) 本实验采用横向对比多种化学交联剂的交联效果,并对各种交联剂的不同最佳使用情况进行研究。

有利于发现多种不同交联剂的优缺点和适用范围,因此可以利用相关特性发现新的可能用于多糖-多肽交联的新型交联剂。

2) 分离交联后的多糖-多肽之后切割成片段,分析参与交联的基团及反应原理,有利于深入了解多糖-多肽的交联反应为优化其反应提供基础

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5. 研究计划与进展

2016年3月到4月完成: 采用单因素实验法和响应曲面法对多种不同的化学交联法和化学交联试剂对特定多糖多肽进行交联反应时的最佳样品浓度对应的交联剂浓度、反应时间、反应温度、缓冲液ph值。

进而分析对比其交联产物的特性和交联度找出最佳的交联法和所用交联试剂。

2016年4月到5月完成:交联完成后用lc或电泳的方法将交联混合物进行分离, 再用水解酶将多肽多糖交联产物水解成多种肽段,然后利用质谱法对肽段进行鉴定以研究多肽多糖复合体内部结构以及相互作用。

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