1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
2004年初,高致病性禽流感就曾在我国鸡群中大规模爆发,禽流感在我国鸡群中出现的时间虽短,但己经并正在给我国养禽业造成巨大的经济损失,很可能成为本世纪威胁我国养禽业的头号大敌。
禽流感病毒的不断进化也对人类健康造成威胁,诊断和治疗禽流感是一个世界性的问题[1]。
h5n1这种可以通过家禽传染给人类的高致病型禽流感病毒在最近几年有不断扩散的趋势。
2. 研究的基本内容和问题
h5n1为卫生部新传染病防治法中规定报告的法定传染病,又称人感染高致病性禽流感。
给我国养禽业造成巨大的经济损失,很可能成为本世纪威胁我国养禽业的头号大敌。
一直以来,国内禽流感的诊断主要采用病毒分离鉴定和禽流感抗体检测两种方法。
3. 研究的方法与方案
本实验采取双抗夹心elisa的方法,对h5n1禽流感抗原进行检测,并研制出准确高效的试剂盒。
其具体实验方案分为一下几步:(1) 将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上,利用抗原抗体结合专一性进行免疫反应的定性和定量检测。
(2) 在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。
4. 研究创新点
一直以来,国内禽流感的诊断主要采用病毒分离鉴定和禽流感抗体检测两种方法。
前者虽然准确,但费时耗力;后者虽然简便、快速,但它不能区分是自然感染还是免疫接种后产生的抗体。
本实验旨在将禽流感病毒夹心elisa快速检测方法组装成诊断试剂盒,便于携带和现地应用,特异性强、敏感性高、重复性好,操作简单、方便,能快速、准确地检测出样品中是否带有aiv抗原。
5. 研究计划与进展
2014.12-2015.1阅读文献、了解H5N1特性和ELISA的基本实验方法2015.3-2015.4.调整抗原包被浓度,调整封闭液、终止液种类和配比2015.4-2015.5 利用夹心ELISA法测定抗原含量、调整一抗和二抗包被浓度,得出整套试剂盒各试剂的数据结论
