1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
淀粉作为自然界能量的主要来源,广泛存在于植物细胞和种子中。
淀粉是多分子聚合物,由直链淀粉和支链淀粉组成。
直链淀粉占淀粉含量的15%~25%,由线性的葡萄糖以 α-1,4 糖苷键构成; 支链淀粉占75%~85%,由若干个寡糖链以α-1,6糖苷键结合在主链上形成分支结构。
2. 研究的基本内容和问题
本实验通过从美国黄石公园的土壤样品中筛选得到产耐热普鲁兰酶的菌株,并通过DNS比色法测定其在60℃、pH6.0条件下普鲁兰酶酶活力,选取酶活力最高的菌株进行16S rDNA序列同源性分析、形态特征观察以及生理生化实验,判断能产耐热普鲁兰酶的菌株的种属,并对其粗酶的酶活性质进行初步探究。
主要的问题:1.如何保证筛选的野生菌株不发生退化;2.如何能较为准确方便的测量普鲁兰酶的酶活。
3. 研究的方法与方案
研究方法:观察法、实验法、定性分析法、描述性研究法技术路线:1.从美国黄石公园的土壤样品中筛选出产普鲁兰酶的菌株2.测定了dns最适添加量曲线和麦芽糖标准曲线,测定筛选出的产普鲁兰酶的菌株的酶活。
3.选取酶活最高的菌株进行16s rdna序列同源性分析、形态特征观察以及生理生化实验,判断能产耐热普鲁兰酶的菌株的种属。
4.对其粗酶的酶活性质进行初步探究。
4. 研究创新点
本实验所分离筛选的菌株是产耐热的普鲁兰酶的菌株,而淀粉水解及发酵的工业过程常常发生在高温环境下(>60℃)。
所以筛选产生耐高温的普鲁兰酶的菌株是领域的研究热点,具有广泛的工业应用前景。
5. 研究计划与进展
2013年9月,相关文献阅读,资料查阅,设计实验;2013年10月,进入实验室 ,学习与实验相关的实验操作技术和仪器设备的使用;2013年11月-2013年12月,完成产普鲁兰酶菌株的筛选;2014年1月,对筛选出的产普鲁兰酶菌株进行16rDNA测序,鉴定菌株;2014年3月-2014年5月,对筛选出的产普鲁兰酶菌株进行生理生化鉴定和简单的酶学性质研究;2014年5月,数据分析及论文撰写
