杨树miR393及其靶基因相互作用研究开题报告

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1. 研究目的与意义

自2002年报道植物中也存在miRNA以来，越来越多的miRNA家族的得以发现，并进行了功能阐明。miRNA可以在转录、转录后、翻译等不同层次上对其靶基因进行精细调控，在生物体内处于基因表达调控的中心位置。目前，miRNA在植物生长发育和防御反应等方面的作用和机制已成为植物表观遗传学研究领域中的热点。

2. 国内外研究现状分析

miR393是在植物中发现和研究得比较早的一个miRNA家族，与植物发育、激素调控、抗逆反应相关。MiR393的一类靶基因是TIR1/AFBs基因家族，在植物中存在范围广泛。有报道显示这些蛋白家族所含有的F-Box功能域同泛素相关功能蛋白的降解作用有关。

3. 研究的基本内容与计划

1）采用基于pcr诱变的大引物法对peafb基因进行多位点突变；

2）ptc-mir393克隆至植物瞬时表达载体p2gw7上;

3)分别将penafb和pdnafbm克隆至植物瞬时表达载体p2gwf7.0上;

4. 研究创新点

本研究借鉴荧光素酶报告基因法鉴定动物miRNA靶标基因的原理，以及高效的杨树原生质体瞬时表达体系为基础，研究Ptc-MIR393对其预测靶基因的标靶作用，进而为植物miRNA与靶基因相互作用机制的研究建立一种比较简单、直观的靶标鉴定方法。