江苏浦口和太湖两地龙虾污染菌群分析研究开题报告

1. 研究目的与意义

克氏原螯虾（procambarus clarkii），俗称小龙虾，原产于墨西哥北部和美国南部，其繁殖能力强，适应性广，是世界上著名的入侵物种之一，现广泛分布于我国长江中下游地区，已成为我国淡水水体中重要经济养殖品种。2010年的南京“小龙虾事件”23人因食用小龙虾患横纹肌溶解综合征（haff病）；2000~2016年全国报道的小龙虾相关横纹肌溶解综合征病例总计466例。江西瑞昌、湖北十堰等地先后出现副溶血性弧菌群体性食物中毒。小龙虾的食品安全问题引起人们重视，针对小龙虾的研究工作也开始增多。

2. 研究内容和预期目标

研究内容：基于传统培养基法和宏基因组测序的方法，分析产自江苏南京浦口、江苏苏州太湖东山两地龙虾的初始菌群，确定不同产地龙虾的特定污染组成。

拟解决的关键问题：确定两个产地小龙虾的初始菌群的种类及数量之间存在的差异

3. 国内外研究现状

肖宁等人从安徽当涂县河道拦网中，取濒临死亡的病虾中分离出弗氏柠檬酸杆菌。张生元等人从安徽肥东某水产养殖场的病虾中分离到布氏柠檬酸杆菌。在一项针对浙北地区小龙虾危害因子分析的研究表明，小龙虾体内的主要污染菌为副溶血性弧菌和铜绿假单胞菌，检出率分别为24.5%，22.1%。李兵兵等人在淮安地区产的生鲜小龙虾中检测出副溶血性弧菌、单增李斯特菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等致病菌。

杨章武、邓晓影、张正、曹荣等人分别利用宏基因组测序法对凡纳滨对虾、南美白对虾、半滑舌鳎消化道、牡蛎的菌群多样性进行了全面的分析。江杨阳等人分别采用传统培养基法和宏基因组测序技术对小龙虾冷藏期间优势腐败菌进行了分析，对比两种测序方法发现，宏基因组测序法检测到的菌属更具有多样性。

4. 计划与进度安排

1. 样品小龙虾的采购及处理

2. 试验相关试剂和仪器的准备

3. 菌落计数及优势腐败菌的保种、分离鉴定

5. 参考文献