乳酸菌去除呕吐毒素机理的初探开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

小麦赤霉病(gibberrella zeae)是我国小麦生产中最重要的病害之一，该病不仅可能引起小麦大幅度减产，甚至产生毁灭性危害，威胁粮食安全，而且赤霉病菌分泌产生呕吐毒素(don)，当含量达到百万分之几的情况下即可造成人畜中毒[1-3]。

近年来，国内外科研机构逐步开展了对呕吐毒素的生物毒性及其防控的一系列研究，并取得了较大的突破。

目前研究表明don通过抑制蛋白质等大分子合成影响细胞增殖、分化;以及通过产生过量的炎症反应和氧化应激介导细胞程序性死亡等途径，对机体不同靶器官产生广泛的毒害作用。

2. 研究的基本内容和问题

研究目标：本课题旨在筛选出能够去除don的乳酸菌，研究其去除机理，并通过培养条件的优化，提高don的去除效率。

为去除don的提供了一种方法，可作为清除don的良好途径，降低霉菌毒素的污染，确保食品安全。

研究内容：（1）利用实验室现有的乳酸菌，以及从泡菜、酸奶、腌鱼中筛出的乳酸菌，与don共培养后，筛选出能够去除don的乳酸菌；（2）筛选出的乳酸菌，研究其去除don的机理。

3. 研究的方法与方案

研究方法：1、主要试剂：脱氧雪腐镰刀菌烯醇 购于加拿大triplebond公司磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、甲醇、尿素、七水合硫酸镁、一水合硫酸锰、氯化钠等。

主要仪器：电子天平、超声波清洗机、超声破碎仪、离心机、双向磁力加热搅拌器、高效液相色谱仪等。

2、实验方案2.1 去除don的乳酸菌的筛选：将活化好的乳酸菌与don共培养，每隔一定时间取样，离心取上清，利用高效液相色谱（hplc）检测；2.2 机理的研究：2.2.1 将don分别与发酵上清液、胞内液、细胞壁作用，37℃培养24h，hplc检测；2.2.2 乳酸菌活化后， 4℃，5000r/min条件下，离心10min，收集菌体调整菌体含量至1010以上，用生理盐水洗涤2次，进行如下处理：（a）121℃,20min；（b）100℃，30min；（c）4mol/l 盐酸，37℃处理1h；（d）8mol/l 尿素；37℃处理1h 6h；（e）溶菌酶，37℃处理18h。

4. 研究创新点

1、乳酸菌清除DON国内研究的不多；副干酪乳杆菌清除DON在国内目前还没有报道；2、使用激光共聚焦显微镜观察作用位点，直观明了。

5. 研究计划与进展

2017.11-2018.1查阅文献、撰写文献综述2018.2-2018.3撰写开题报告2018.3-2018.5乳酸菌去除呕吐毒素机理的研究2018.5撰写论文