半乳糖基月桂酸甘油单酯抑菌活性的研究开题报告

 2022-01-21 09:01

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

1.1意义由于近年来食品安全事件频发,人们对食品安全性的关注大幅提高,且随着经济水平的提高,人们的健康意识也逐步提高。

传统的食品防腐剂由于其抑菌稳定性不高、抑菌谱较窄及存在食品安全风险等弊端已渐渐不能满足人们的要求。

因此,开发新型的安全无毒、抑菌活性强、适用性广、稳定性高的新型食品防腐剂已成为迫在眉睫的研究工作。

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2. 研究的基本内容和问题

2.1目标在实验室已有基础上,利用酶法催化合成半乳糖基月桂酸甘油单酯并对其提纯,经一系列理化及微生物试验后,研究并总结半乳糖基月桂酸甘油单酯的抑菌活性。

证明半乳糖基月桂酸甘油单酯具有良好抑菌活性。

2.2内容本实验主要研究半乳糖基月桂酸甘油单酯的抑菌活性:实验以蜡样芽孢杆菌为指示菌,测定半乳糖基月桂酸甘油单酯的抑菌活性和最小抑菌浓度以、半乳糖基月桂酸甘油单酯对菌体生长曲线及菌体细胞膜的影响及抑菌动力学实验2.3拟解决的问题若试验可成功验证半乳糖基月桂酸甘油单酯具有良好的抑菌活性,就可以为进一步深入了解和利用半乳糖基月桂酸甘油单酯奠定基础。

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3. 研究的方法与方案

3.1研究方法在实验进行中需要针对实验的各个阶段、各个部分提出不同的试验方法。

首先是样品的合成,以酶法催化合成半乳糖基甘油再进一步合成半乳糖基月桂酸甘油单酯。

其次是实验的主体部分,以nb培养基对菌进行增殖,后经离心获得菌悬液;用打孔法测定半乳糖基月桂酸甘油单酯的抑菌活性;用倍比稀释法测定半乳糖基月桂酸甘油单酯的最小抑菌浓度;用分光光度计测定od600的方法测定半乳糖基月桂酸甘油单酯对菌体生长曲线的影响;用平板计数法进行抑菌动力学实验;用分光光度计测定od260、od280的方法测定半乳糖基月桂酸甘油单酯对菌体细胞膜的影响。

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4. 研究创新点

目前对甘油糖脂生物活性研究较多的为抗肿瘤、抗hiv、抗炎、抗菌、增强机体免疫功能等,但对甘油糖酯的抑菌活性研究相对较少。

而针对甘油糖酯的抑菌活性的研究中,甘油糖酯多为从自然界中动物组织、植物及微生物中提取,如:deml等从人工培养的霉菌schizonella melanograma中分离出甘油糖脂schizinellin a和b;dai等从菊科植物的根茎中分离得到三种甘油糖脂。

本实验则是利用酶法人工催化合成半乳糖基月桂酸甘油单酯。

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5. 研究计划与进展

本实验计划于2017.09至2018.04间进行,为了更有效的安排实验时间、提高实验效率,初步将本实验整体划分为准备阶段、试验阶段、分析及总结三个阶段。

第一阶段:准备阶段(2017.09-2017.10)实验室自行制备半乳糖基甘油,后以半乳糖基甘油为原料制备半乳糖基月桂酸甘油酯,进一步提纯得到半乳糖基月桂酸甘油单酯。

第二阶段:主体实验阶段(2017.10-2018.1)主体实验阶段可分为六个小部分:1、菌悬液的制作;2、对半乳糖基月桂酸甘油单酯抑菌活性的测定;3、半乳糖基月桂酸甘油单酯最小抑菌浓度的测定;4、测定半乳糖基月桂酸甘油单酯对菌体生长曲线的影响;5、抑菌动力学实验;6、测定半乳糖基月桂酸甘油单酯对菌体细胞膜的影响;经实验后,将试验中的数据进行整理归纳,在实验室进行比对与研究,若出现较大误差及时查明原因并进行改正,以便后续试验进行。

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