1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
本课题的意义：
食源性疾病是当前世界上最突出的卫生问题，其发病率居各类疾病发病率的前列。致病因子通过饮食进入人体后会引起机体各种生理或病理性改变如慢性炎症反应，从而导致人体体液免疫和细胞免疫发生相应变化，与此同时血液中血浆或白细胞上糖蛋白结合糖链也会产生变化，成为发现疾病和追踪疾病进程的指征。
n-连接寡糖是生物体内最为复杂的也是最为常见修饰方式，其在蛋白合成、折叠、运输的整个过程中都有极其重要的生理功能。以往的研究表明，n-连接寡糖结构和含量的改变与疾病（例如炎症反应和癌症等）密切相关。然而对于人体血液中全部n一链寡糖组的结构信息的系统分析和比较的报道国内乃至国际都不是很多。
2. 研究的基本内容和问题
目标：建立和优化血浆及白细胞n-连接寡糖结构的检测方法以及血浆n-糖组的结构鉴定。
内容：打通从血液样本处理、糖链释放、荧光标记到超高效液相检测的整个分析流程，建立血浆及白细胞n-连接寡糖结构的检测方法，并分别对血液样本前处理方法、糖链荧光标记的条件和高效液相色谱条件进行优化，并对于n-连接寡糖的处理方法灵敏度、重复性以及可靠性进行验证。此外还利用超高效液相色谱结合外切糖苷技术以及maldi-tof质谱对血浆中n-糖链的结构进行鉴定。
拟解决的关键问题：
3. 研究的方法与方案
研究方法、实验方案、技术路线：
1.人体新鲜血液收集：用真空负压管抽取a、b、o、ab四种不同血型的血液5ml。
2.血浆、白细胞的提取：用高速冷冻离心机以500g离心力15min离心血液，取上清（血浆）；下层用红细胞裂解液处理，离心取沉淀（白细胞）。将其放置于-20℃保存。
4. 研究创新点
1.在提取、分离与标记糖链时，对现有的多种方法进行了优化分析，选择出了适合人体血液的最佳处理方法；
2.在N-连接寡糖结构的检测时，利用高效液相色谱、荧光标记、外切糖苷技术等方法对糖链结构进行分析，使得结构分析的结果更准确与客观。
5. 研究计划与进展
1.2016年9月20日2016年10月8日：查阅文献，确定实验方法，设计实验流程。
2.2016年10月9日2016年11月1日：完成各种血液的提取与血浆、白细胞的获得，获得实验所需的原材料。
3.2016年11月2日2016年11月10日：完成n-连接寡糖的分离与提取，对tca法、有机溶剂法以及加热法进行比较。
