1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
1、研究意义
蛋白质糖基化是蛋白质重要的翻译后修饰途径之一，广泛存在于古细菌、细菌以及真核生物的生命体中，尤其在真核生物中，大部分蛋白质都以糖蛋白的形式存在。糖作为四大生物大分子之一，尽管很早就被科学家们认识，但是对它的研究却远远滞后于蛋白质、核酸和脂类[1]。近几年，随着人们对糖类物质研究的不断深入，发现糖链作为生物信息分子参与了生物体几乎所有的生命过程，特别是在细胞分化、发育、免疫、老化、癌变、信息传递等生命和疾病过程中起着特异性的识别、介导与调控作用[2]。因此，对糖链结构及其生物学作用的研究对揭示生命现象的本质具有重要意义。
近些年来，虽然随着现代分析技术的出现和发展，新技术的引入使得糖链的结构工作已经不再如以前那样令人生畏，但与蛋白质、核酸的一级结构常规分析技术相比，尤其是对从细胞膜上获取的极微量的寡糖链的分析，仍是一项难度很大的工作[3,4]，要全面研究蛋白质糖基化存在相当大的困难。由于糖不是基因的直接编码产物，且相同单糖组成的糖链其连接方式、糖苷键键型和连接位点都有可能不同，因此糖的分子结构远比蛋白质和核酸复杂得多，对糖链进行结构分析也远比对蛋白质和核酸进行分子结构分析要困难得多，那么建立一种有效的糖链分离分析的方法就显得尤为重要。
2. 研究的基本内容和问题
1.1研究目标
本课题将以牛肌肉组织（心、肝、肉、肾）中的糖蛋白为研究对象，将其从组织中提取出来，再采用酶法释放肌肉中的n-连接糖链，经荧光化衍生后，利用超高压液相色谱（uhplc）分析糖链，为后续糖链生物学功能研究和来源于其它动物组织的糖蛋白糖链的分析提供参考。
1.2研究内容
3. 研究的方法与方案
2.1拟采取的研究方法
采用n-糖肽酶f（pngase f）释放牛肌肉组织（心、肝、肉、肾）中的n-糖链，经荧光标记后，利用超高压液相色谱(uhplc)分析糖链。
2.2技术路线
4. 研究创新点
与HPLC相比，UHPLC具有更快的分析速度、更好的分离度和更高的灵敏度。本课题采用UHPLC对来源于牛肌肉组织（心、肝、肉、肾）糖蛋白糖链的分离，将进一步拓展UHPLC在糖链分离分析方面的应用，为后续糖链生物学功能的研究以及其它动物源糖蛋白的分析提供参考。
5. 研究计划与进展
2014年10月---2014年11月：查看文献，将课题进行所需的资料进一步完善；准备实验所需的实验仪器以及实验材料，确定实验流程。
2014年11月---2014年12月：制备牛肌肉组织的糖蛋白样品
2014年12月---2015年01月：酶法n-糖链以及糖链的荧光衍生
