1. 研究目的与意义
丹参为中国传统中药，为唇形科植物丹参salviamiltiorrhizabge.的干燥根和根茎，气微、味微苦涩，具有活血祛瘀、通经止痛、清心除烦、凉血消痈的功效，适用于胸痹心痛、脘腹胁痛、癥瘕积聚、热痹疼痛、心烦不眠、月经不调、痛经经闭、疮疡肿痛。现代药理研究证明，丹参具有抗氧化、抗血栓、抗肿瘤、增强免疫力的作用，而作为目前心血管疾病的首选药材，其真伪和质量的优劣与临床药效及安全密切相关。
本论文对丹参的基源、产地和功效等方面进行本草考证，了解其从古至今品种的变迁，以便对丹参进行更深入的研究。对丹参的商品规格进行调查，并对已有的伪品进行整理，从性状鉴别、显微鉴别和理化鉴别对丹参进行真伪鉴别和质量检验。此外，对丹参的化学成分、药理作用和临床应用进行整理综述，全面了解丹参的功效主治，从而体现对丹参药材进行真伪鉴别和品质评价的重要性。
首先对丹参进行本草考证，根据查阅历代草本和文献，从原植物特征、基源、药材性状、功效主治等方面比较，证明历代本草所记载的丹参与现在药典记载的丹参为同一来源。而道地产区由于历史变迁、各地栽培、气候环境的变化等，出现了很大的变化。
2. 文献综述
丹参的商品质量和品质评价
黄楚璇
3. 设计方案和技术路线
研究方案 1性状鉴别 1.1性状特征根茎短粗，顶端有时残留茎基。根数条，长圆柱形，略弯曲，有的分枝并具须状细根，长10~20cm，直径0.3~1cm；表面棕红色或暗棕红色，粗糙，具纵皱纹。老根外皮疏松，多显紫棕色，常呈鳞片状剥落。质硬而脆，断面疏松，有裂隙或略平整而致密，皮部棕红色，木部灰黄色或紫褐色，导管束黄白色，呈放射状排列。气微，味微苦。栽培品较粗壮，直径0.5～1.5cm；表面红棕色，具纵皱纹，外皮紧贴不易剥落；质坚实，断面较平整，略呈角质样。 1.2水试法取本品少量，用温水浸泡2h，水溶液无色，药材稍膨胀，颜色稍微变浅，断面润滑感强。 2显微鉴别 2.1根的横切面木栓细胞3~7层，细胞小而近等径，排列密集；外侧有时可见落皮层；栓内层的厚度是木栓的2~3倍，细胞呈方形或类方形，排列紧密。次生韧皮部较窄，约占横切面的1/4，由筛管群和薄壁细胞组成。形成层环状明显。次生木质部宽广，临近维管形成层处，管孔链切向或径向排列，总体轮廓成丁型；木纤维发达，多成群分布于大导管周围；有的木质部束内有1~2群木化薄壁细胞；木射线宽广，射线细胞多木质化增厚。髓存在。 2.2粉末粉末呈红棕色。木栓细胞黄棕色，表面观呈类方形或多角形，壁稍厚，弯曲或平直；胞腔内常含红棕色色素，色素溶解后，断面观细胞类长方形，排列较整齐。木纤维长梭形，末端长尖；纹孔斜裂缝状或十字状，孔沟较稀疏；多成束。导管为网纹和具缘纹孔；网纹导管分子长梭形，网孔狭细，穿孔多位于侧壁。石细胞呈类圆形、类长方形或不规则形，有的含棕色物。 3理化鉴别 3.1薄层色谱法 3.1.1乙醚提取丹参药材粉末，挥干后溶解于乙酸乙酯，作供试品溶液。以丹参对照药材和丹参酮ⅡA对照品作为对照，用硅胶G板，以石油醚（60~90℃）-乙酸乙酯（4:1）为展开剂。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，应显相同颜色的斑点；在与对照品色谱相应的位置上，应显相同的暗红色斑点。 3.1.2用75％甲醇回流提取丹参药材粉末作供试品溶液。取丹酚酸B对照品加75％甲醇制成对照品溶液，用硅胶GF254板，以甲苯-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（2:3:4:0.5:2）为展开剂，置紫外光灯（254nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，应显相同颜色的斑点。 3.2高效液相色谱法 3.2.1丹参酮ⅡA以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水（75:25）为流动相；检测波长为270nm。理论板数按丹参酮ⅡA峰计算应不低于2000。取丹参酮ⅡA对照品置棕色量瓶中，加甲醇制成对照品溶液。取丹参粉末置具塞锥形瓶中，用甲醇加热回流提取制成供试品溶液。分别吸取对照品和供试品溶液注入高效液相色谱仪进行测定，即得。 3.2.2丹酚酸B以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-乙腈-甲酸-水（30:10:1:59）为流动相；检测波长为286nm。理论板数按丹酚酸B峰计算应不低于2000。取丹酚酸B对照品加75％甲醇制成对照品溶液。取丹参粉末置具塞锥形瓶中，用75％甲醇加热回流提取制成供试品溶液。分别吸取对照品溶液与供试品溶液注入高效液相色谱仪进行测定，即得。 3.4指纹图谱鉴别法选择适宜的色谱柱，柱温箱温度为30℃，检测波长为270nm。分析时采用1%三氟乙酸水溶液-乙腈（8.5:1.5）的梯度洗脱系统，流动相为1%三氟乙酸水溶液-乙腈（6.4:3.6）。丹参药材打粉，过筛，取粉末精密称定，置具有冷凝回流装置的圆底烧瓶中，用水煎煮提取1h放冷，后加入甲醇摇匀，放置，过滤，滤液通过微孔滤膜，用于HPLC进样分析。 技术路线 |
4. 工作计划
2022.1.52022.1.12查阅资料，整理石蜡切片制作步骤 2022.1.132022.1.20学习使用石蜡切片仪器，熟练掌握整个操作流程 2022.1.212022.2.2选定毕业论文题目，查阅文献收集资料 2022.2.32022.3.9收集实验药材，整理文献资料，撰写文献综述开题报告并完成开题报告 2022.3.102022.4.9实验设计及实验前所需材料准备，完成各批丹参药材的性状鉴别、粉末显微鉴别、薄层鉴别和HPLC含量测定。 2022.4.102022.5.1制作石蜡切片进行丹参根横切、纵切显微鉴别，并开始撰写毕业论文 2022.5.12022.6.1完成丹参的指纹图谱，完成毕业论文的撰写 2022.6.12022.6.15提交毕业论文，准备论文答辩 |
5. 难点与创新点
1、制作石蜡永久切片，对丹参进行横切与不同纵切，进行显微结构比较，更全面观察其显微结构。 2、使用新型石蜡切片仪器，操作更加简洁，避免人为操作时的失误，制得的切片更加清晰，易于观察。 3、对丹参伪劣品进行鉴定，对染色丹参的染色剂进行成分分析。 4、分析并验证不同批丹参质量差别的影响因素。 5、研究丹参其它成分含量与丹参质量的关系。 6、利用石细胞计数器鉴别真伪丹参。 7、指纹图谱法鉴别丹参真伪，评价丹参药材质量。 |
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