赤芍中芍药苷含量测定影响因素的研究开题报告

1. 研究目的与意义

《中国药典》2000年版开始收载高效液相色谱（hplc）法测定赤芍中芍药苷含量的方法，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-0.05mol/l磷酸二氢钾溶液(40: 65)为流动相，检测波长为230nm；芍药苷对照品甲醇溶液浓度0.5mg/ml；供试品提取方法：约0.5g赤芍粗粉，加甲醇25ml，浸泡4小时，超声处理20分钟；规定赤芍药材及饮片含芍药苷的限度，分别为不得少于1.8%、1.5%。

《中国药典》2005年版、2010年版、2015年版沿用。

对上述《中国药典》收载的hplc法测定赤芍中芍药苷含量的影响因素进行系统研究，改进流动相、对照品溶液及供试品溶液的制备方法，验证改进的含量测定方法；采用药典方法、改进方法，测定多个主产地的多批赤芍样品，对比两种方法的测定结果，提出修订赤芍含量测定方法、芍药苷限度的建议，提高赤芍含量测定方法的准确性，以保证赤芍质量，并且操作简便，为《中国药典》2020年版修订赤芍质量标准积累数据、提供参考。

2. 文献综述

赤芍为毛茛科植物芍药 paeonia lactiflora pall.或川赤芍paeonia veitchii lynch的干燥根；春、秋二季采挖，除去根茎、须根及泥沙，晒干；味苦，性微寒，归肝经；具有清热凉血、散瘀止痛的功能；用于热入营血，温毒发斑，吐血衄血，目赤肿痛，肝郁胁痛，经闭痛经，癥瘕腹痛，跌扑损伤，痈肿疮疡[1]。

以芍药加工的赤芍，主产地为于内蒙古、黑龙江、吉林、辽宁、河北、山西；以川赤芍加工的赤芍，主产地为四川、甘肃。

本文对赤芍的主要成分、含量测定方法的研究进展与应用等方面展开讨论，为对赤芍中芍药苷含量测定影响因素的研究提供参考。

3. 设计方案和技术路线

1、流动相的选择：分别采用四种流动相测定，甲醇-水（30:70）；乙腈-水（20:80）；乙腈-0.1%磷酸溶液（14:86）；甲醇-0.05mol/l磷酸二氢钾溶液(40:65)，这是《中国药典》赤芍项下使用的流动相，组分中含盐易堵塞色谱柱和通道，样品测定后必须先用水洗净盐、再用甲醇洗，并且必须逐渐改变溶剂组成，洗柱时间长。

根据测定结果选择流动相。

2、对照品溶液的浓度：为避免色谱柱超载，利于测定后清洗、延长其使用时间，降低芍药苷对照品甲醇溶液浓度至0.2mg/ml。

4. 工作计划

2022年3月，收集主地产内蒙、黑龙江、四川的赤芍样品，请专家对收集的样品进行鉴定。

2022年4 月，优化流动相；按照研究方案，考察供试品溶液的制备方法，进行供试品粒度、提取溶剂、浸泡时间、超声处理时间的研究，优化供试品溶液的制备方法。

2022年5月，验证改进的含量测定方法；采用《中国药典》赤芍项下的含量测定方法、拟改进的赤芍含量测定方法，进行多个主产地的多批样品测定，对比两种方法的测定结果，提出修订赤芍含量测定方法、芍药苷限度的建议，撰写论文。

5. 难点与创新点

特色：质量标准基础研究，探讨《中国药典》2000年版～2015年版收载的HPLC法测定赤芍中芍药苷含量的影响因素，参照《国家药品标准（中药）研究制定技术要求》、《药品质量标准分析方法验证指导原则》，对影响因素进行系统研究，收集多个主产地的多批赤芍样品，对比两种方法的测定结果，为修订《中国药典》2020年版赤芍质量标准提供参考。

创新：改进流动相的组成、对照品溶液的制备方法、供试品溶液的制备方法；验证改进的HPLC法测定赤芍中芍药苷含量的方法，测定赤芍主产地多批次的样品含量，提出提高限度的建议。