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1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
1.课题意义
脱氧雪腐镰刀菌烯醇(don),又称呕吐毒素,是镰刀菌属产生的一种单端孢霉烯族毒素,其物理性质十分稳定,具有耐热、耐压、耐弱酸等特性,一般食品加工过程并不能破坏其结构[1]。呕吐毒素是一种较为常见的真菌毒素,广泛存在于小麦、玉米等粮谷原料及其制品中,在全世界范围内都有较高的污染率[2]。呕吐毒素具有有致畸、致突变、致癌、免疫抑制性质等毒性[3]。目前国内外有多种检测方法,但是都存在一定的缺陷。样品的前处理过程一般会耗去整个检测时间的70-80%,有时候甚至更大,所以找到一种快速且高效的样品前处理方式是提高真菌毒素检测效率的关键。
2. 国内外研究进展
2. 研究的基本内容和问题
1.研究目标
前处理在在真菌毒素检测方面至关重要的过程,目前大部分前处理方法易受外因影响,且耗时较长,使整个检测过程过于耗时,有些还不够准确,所以本实验意在找到一种相对稳定、用时更短的前处理方式,优化整个检测过程。
2.关键问题
3. 研究的方法与方案
1.研究过程
本实验在前期查找大量与脱氧雪腐镰刀菌烯醇检测方法、双水相萃取技术、气质联用技术等相关文献,经过比较论证,选择在现有检测技术基础上进行优化,改进检测方法的前处理过程,以达到使真菌毒素检测方法更加快速、准确的目的。
4. 研究创新点
大部分脱氧雪腐镰刀烯醇(DON)的前处理方式包括有机溶剂提取DON(利用一定浓度的有机溶剂水溶液提取样品中的DON)、液-液萃取、固相萃取等,但现有前处理方法普遍存在耗时、操作步骤多、需要大量的有机试剂而造成环境污染等问题。但采用双水相萃取,能够有效改善上述情况,因此我们决定采用双水相萃取结合超声提取的方法来提取样品中的DON,通过优化提取过程,来提高呕吐毒素的提取效率。
双水相系统是指当两种聚合物、一种聚合物与一种亲液盐或是两种盐(一种是离散盐且另一种是亲液盐)在适当的浓度或是在一个特定的温度下相混合在一起时就形成的系统,双水相萃取对于传统溶剂萃取来说是个集提取与浓缩于一体的新方法,传统方法中提取和提纯分为两个部分,而双水相系统在提纯的同时也具有浓缩的功能,有效节约了前处理时间,同时也一定程度上避免了由于步骤繁琐可能引入的杂质的问题。
5. 研究计划与进展
前期,通过查阅文献、分析论证找到合适的样品前处理方法。
实验过程中,确定在现有检测技术的基础上,通过优化样品前处理方法,来达到快速检测呕吐毒素的实验目的。选用双水相萃取对样品进行前处理,找到最优双水相体系并优化,验证方法的有效性,随后应用于样品中don的检测。
通过本实验,预期建立一种能够快速有效地检测呕吐毒素的方法。
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