1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
1.研究意义
食用菌是我国改革开放30多年来形成的新兴战略产业。目前全国年产量2800万吨,占世界的75%以上,栽培种类有50种,是世界栽培种类最多的国家,产值1700亿元,从业2000万人以上。食用菌产业在我国发展迅速,近年来国家对食用菌产业支持力度逐年加大。但因基础研究薄弱,与国外相比,我国食用菌在产量和品质上差距较大。我国食用菌行业还面临单产低、品质差、产业效益不断下降的困境。亟需开展系统的基础科学研究。
杏鲍菇(pleurotus eryngii)是国内生产和消费量最大的食用菌之一。据食用菌工厂化生产及市场情况调研报告统计,2012年全国杏鲍菇平均日产量已达到1562.85吨,并呈现逐年递增的趋势。杏鲍菇营养物质含量丰富,具有抗癌、抗氧化、降血脂、缓解骨质疏松、润肠胃等功效[1-4],是极具开发潜力的新兴功能食品原料。杏鲍菇具有多种生理活性是由其生物化学成分决定的,目前认为活性多糖和活性蛋白是杏鲍菇的有效活性成分[5]。近年来,研究发现食用菌中存在具有免疫调节和凝集细胞活性的小分子蛋白质,其结构功能类似于植物凝集素和免疫球蛋白。这些小分子蛋白质参与和介导了免疫功能的调节,能够提高机体的免疫功能,同时对正常细胞没有毒副作用,是一种良好的免疫调节剂[6,7]。然而蛋白质结构复杂,其免疫调节的构效关系以及作用机制至今仍不明确。
2. 研究的基本内容和问题
1.研究目的
研究超声辅助、酶解辅助结合硫酸铵沉淀法提取杏鲍菇免疫活性蛋白的方法,并选择合适的工艺参数(超声辅助功率、提取时间、加酶量等),通过响应曲面法优化其提取条件。
2.研究内容:
在单因素条件下研究各类工艺参数的最佳值,研究出最佳的超声辅助功率、提取时间、提取温度以及加酶量等对提取效率的影响。最终采用响应曲面优化法获得提取蛋白质的最佳实验条件。
3. 研究的方法与方案
可行性高
4. 研究创新点
本实验结合杏鲍菇营养成分的特性,将蛋白质作为研究对象,对杏鲍菇这种传统食用菌的蛋白质进行研究。在真菌蛋白质提取及应用方面具有创新性,但是目前针对这一方面的报道鲜少,本项目通过研究最佳提取条件,作为真菌蛋白领域的新突破,为杏鲍菇蛋白身乃至真菌蛋白的应用开发提供新的设想与初步的理论依据。
5. 研究计划与进展
进度安排
2015年4月-2015 年5:月研究利用酶解提取等方法提取杏鲍菇蛋白技术,优化提取条件。
对不同品种杏鲍菇蛋白进行提取,通过巨噬细胞等体外细胞模型对不同品种杏鲍菇蛋白进行体外毒性试验以及巨噬细胞体外免疫调节实验,对不同品种杏鲍菇进行活性追踪,筛选出具有高免疫调节活性蛋白的杏鲍菇品种。
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