双特异抗体的重组表达，纯化和质量分析文献综述

一、选题意义双特异抗体bispecific antibodies，又称双功能抗体，含有2种特异性抗原结合位点的人工抗体，能在靶细胞和功能分子(细胞)之间架起桥梁应，激发具有导向性的免疫反应。

在过去的近二十年间，双特异抗体作为抗体研究领域的热点，在免疫治疗方面激起的疗法革命有目共睹。

目前双特异抗体已有一百多种不同的形式，包括由两个不同抗体的抗原结合区组成的小分子双特异抗体，具有IgG结构域的蛋白分子或者与异二聚体分子结合的大分子抗体等等。

传统的抗体免疫球蛋白一般是单一的抗原结合分子，每个分子由两条重链和两条轻链组成Y型结构。

Y型上端由VH-VL组成Fab，决定抗体所结合的抗原并能与抗原特异结合；下端为Fc区，无抗原结合功能。

传统抗体分子只能与单一性抗原结合，靶向定位以及结合能力在临床治疗等方面不够理想，而通过不同方式构建成具有两个甚至多个抗原表位的双特异抗体能同时结合两个或多个可识别位点，具有良好的靶向定位功能，在肿瘤等疾病的治疗中具有显著效果和重要意义。

二、BsAb研究现状双特异抗体的历史不算太长：从上世纪60年代来自不同多克隆血清的Fab重新组合连接形成双特异的F（ab）2开始，1975年左右的杂交瘤技术大幅促进了其发展，而重组抗体技术的发展使构建特定结构和组成，形成特定生化性质和生理功能以及药效成为可能。

目前BsAb结构构建研究的主流和热点也主要集中于通过基因工程的手段使其表达。

已有多个基于双特异抗体的药物进入临床研究阶段，如比利时 Ablynx公司利用纳米抗体构建的双特异纳米抗体caplacizumab已完成临床Ⅲ期研究，且显示出良好的安全性。

三、论文提纲本次实验将从构建双特异抗体开始，完成其表达、纯化及质量分析等下游检控过程构建双特异抗体的方式有许多，如通过接头直接连接两个完整抗体分子，杂交IgG，连接scFv，衔接蛋白Fusion protein连接等。