MSC保护LPS诱导人脐静脉内皮细胞损伤作用研究文献综述

开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）

一、拟研究的问题

肿瘤微环境由不同细胞类型如成纤维细胞，内皮细胞，间充质干细胞（MSC）和炎性细胞以及这些细胞分泌的细胞因子和生长因子的复杂串扰组成。炎症多会与肿瘤形成相关，尤其对那些患有慢性损伤的组织而言。 因此，恶性肿瘤也可能被认为是慢性炎症或永不愈合的伤口。基于MSCs被招募到受伤组织的性质，MSC可以被吸引到周围的肿瘤基质，并在调节癌症进展中发挥作用。如今正在广泛研究MSC，并且已经成为当前治疗研究的巨大前景。这些细胞的热情主要是由于它们在许多细胞类型中的分化能力，自我更新能力和包括免疫调节作用的旁分泌活性。与最初的想法相反，区分能力不是使这些细胞对治疗目的有吸引力的主要特征。越来越多的证据表明，这些细胞的分泌，如核苷酸，生长因子，细胞因子和趋化因子，构成其最多重要的治疗作用机制。

基于以上研究现状，实验分离培养msc干细胞，测定其分泌的细胞因子情况，并观察msc干细胞对LPS诱导的人脐静脉内皮细胞损伤是否具有一定保护作用。

二、研究目标、采用的手段

u研究目标：小鼠骨髓间充质干细胞（MSC）能够分泌多种细胞生长因子参与机体的损伤修复，利用其旁分泌的作用，在体外内皮细胞损伤模型中，MSC的条件培养基能够逆转脂多糖（LPS）诱导人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的损伤，降低细胞的炎症因子水平，改善内皮细胞渗透性，并且在促进细胞的迁移和抑制凋亡方面有显著的影响。

u研究手段：第4-6代MSC无血清培养24h，收集细胞培养基上清离心过滤，可以收获间充质干细胞条件培养基（MSC-CM）,体外培养HUVEC，使用LPS诱导内皮细胞损伤，同时加入MSC的条件培养基共培养，设置对照组、损伤组、治疗组，检测炎症因子IL-6、IL-8、、TNF-a，细胞间粘附分子ICAM-1、VCAM-1、粘附连接蛋白VE-cadheri的表达水平，划痕实验检测对细胞迁移的影响，MTT检测对细胞增殖的影响。

三、文献综述

在许多血管炎性疾病中，大多是由于内皮通透性过高引起。;因此，我们进行了一项实验来研究这些细胞因子是否对HUVEC的屏障功能有任何影响。内皮细胞通透性的增加可以由来自多种炎症介质的刺激引起，所述炎症介质包括LPS，革兰氏阴性细菌的外膜中的内毒素，其刺激单核细胞和嗜中性粒细胞产生免疫调节和促炎细胞因子。其中， 用LPS刺激以剂量依赖的方式对HUVEC上的FITC-葡聚糖扩散速率更高，有研究表明，LPS 通过与内皮细胞表面的TLＲ4 结合，激活NF-kappa;B 信号通路，促进NF-kappa;B 核内转移，启动靶基因的转录和表达，诱导炎症因子TNF-alpha; 等释放，损害内皮细胞并致其通透性增加、功能障碍。

研究表明，体外培养的干细胞可以在不同条件下诱导分化为心肌、内皮、神经等组织细胞。，显示了其在细胞移植治疗中的潜在作用。除了能直接分化为受体组织外，细胞移植的功效还得益于其分泌的一些促血管生成及抗凋亡的生长因子。干细胞能分泌多种生长因子，在体外实验中，这些细胞因子能刺激内皮细胞的增殖，并能抑制肿瘤坏死因子alpha;诱导的细胞凋亡，提高内皮细胞的存活率。