茶多酚对稻瘟病菌细胞形态及生理生化指标的影响开题报告

1. 研究目的与意义

稻瘟病又称稻热病、火烧病、叩头瘟，是由子囊菌引起的水稻的重要病害之一，可引起大幅度减产，一般减产10%-20%，重达40%-50%，特别严重的则颗粒无收^[1]。目前，防治稻瘟病的手段主要有选育抗性品种和使用化学农药。选育抗性品种固然是最经济、最有效的措施，但由于稻瘟生理小种的复杂性和高度变异，选育的抗性品种往往会在连续种植2-3个季节后就会失去抗性。目前对抗性基因的了解还不是很清楚，要培育出具有广谱性和持久性的抗病品种还是一个难题。化学农药具有高效、速效、使用方便、经济效益高的优点，但是化学农药的过度使用则会导致农田生态系统遭到破坏，不利于农业生产的正常发展，同时大量使用化学农药会使稻米中农药残留超标，威胁消费者的身体健康。因此寻求有效防治稻瘟病的方法和途径有十分重要的意义和广阔的应用前景。

植物源农药具有高效、低毒、选择性高，不易使害虫、病菌产生抗药性的特点，与自然环境有良好的相容性，因此利用植物源农药进行稻瘟病菌的田间防治具有重要意义。目前很多植物已经成为农药的直接来源，最近昆明植物所从植物吴茱萸中分离出一种吲哚生物碱化合物，对稻瘟病有显著的抑菌活性^[2]；杨胜远等从40种中草药提取物中找到了一种对芒果蒂腐病的有抑菌作用的植物五倍子^[3]。此外，豆科植物紫穗槐的活性成分提取物对稻瘟病菌和灰霉病菌也有抑制作用；以上的研究将为植物源农药的研发开辟新思路。

茶多酚（teapolyphenols）是茶叶中多酚类物质的总称，即茶叶中所含的一类多羟基类化合物，简称tp，属于植物源农药。包括黄烷醇类、花色苷类、黄酮类、黄酮醇类和酚酸类等。其中最重要的为儿茶素类，约占多酚类总量的60~80%^[4]。儿茶素类化合物主要包括儿茶素（ec）、没食子儿茶素（egc）、儿茶素没食子酸酯（ecg）和没食子儿茶素没食子酸酯（egcg）4种物质。茶多酚作为一种广谱、强效、低毒的抗菌药物已被世界许多国家学者所公认。茶多酚的抗菌机制主要有3种：（1）破坏细菌细胞膜的脂质层，使细菌发生形态学改变；（2）抑制有害细菌分泌毒素的活性；（3）抑制有害细菌的侵染。

2. 研究内容和预期目标

研究内容

1. 不同浓度茶多酚对稻瘟病菌的抑制作用

2. 不同浓度茶多酚抑制稻瘟病菌的生理生化指标的测定

3. 研究的方法与步骤

1、材料

1.1供试试剂：茶多酚为市售产品，茶多酚有效含量为50%^[1]。用无菌水配成浓度分别为100、50、33.4、25、20 mg/ml的茶多酚母液各50 ml。细胞器分离缓冲液(stc)、om缓冲液、山梨醇缓冲液、二甲基亚砜（dmso）、考马斯亮蓝g-250溶液、tris-hcl缓冲液、牛血清蛋白溶液、3,5－二硝基水杨酸(dns)、0.8 mol /l硼酸钾、1%对二甲氨基苯甲醛( dmab)、胶状几丁质。

1.2 供试菌种和培养基：稻瘟病菌（pyriculariaoryzae cav）,由江苏农科院提供。同时在psa平板上预培养6 d。培养基为马铃薯蔗糖琼脂固体培养基（psa）、马铃薯蔗糖琼脂液体培养基（ps）、完全培养基（cm）。

4. 参考文献

[1]陆亚萍, 徐烈明, 吴德君. 稻瘟病的防治现状及非农药防治途径[j].现代农业科技，2011,24:216-218

[2]穆常青, 陆庆光, 蒋细良, 等. 防治稻瘟病的生物农药研究进展. 迈入二十一世纪的中国生物防治[m],北京:中国农业科学技术出版社, 2005,557-561

[3]肖功年, 杨胜远, 李湘萍, 等. 芒果采后防腐保鲜研究概况[j].食品研究与开发，2001,22(5):63-65

5. 计划与进度安排

1、2022年2月20日～2022年3月5日，接受任务、查阅和翻译文献，撰写开题报告；

2、2022年3月6日-2022年3月19日，完成实验前准备工作，配制各实验所需药品。

3、2022年3月20日～2022年4月2日，预实验。